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如何選擇合適的二抗？

二抗是在其他宿主體內(nèi)制備的能與一抗或一抗片段結(jié)合的抗體，上面通常連有酶或熒光素等標記物。二抗針對某一特定物種的所有抗體均具有特異性，因而使用標記的二抗可以免去對每一個一抗進行標記，大大節(jié)省了時間和費用。

檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇，同時在后繼實驗中也會有不同的檢測方案，如ELISA、WB、IHC、IF、IP、Flo等，因此在選擇二抗的時候要綜合考慮一抗的類型及后繼檢測方案的要求，一般來說，選擇合適的二抗需要從下面幾個方面考慮：

一抗的種屬來源：

      二抗應根據(jù)一抗的物種來源選擇相應的抗該物種的二抗，例如：如果一抗是小鼠源的單克隆抗體，二抗則選抗小鼠的二抗。

一抗的類別與亞型：

      二抗需與一抗的類別或亞類相匹配，通常是針對單克隆抗體而言。如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類，那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合，在不清楚一抗為何種類/亞類的情況下，可以選用抗相應物種IgG,或者你也可以選擇專門針對這一亞類的二抗。

二抗的種屬來源：

      二抗的種屬來源與其質(zhì)量沒有必然的聯(lián)系，不同來源的二抗在一般的實驗里沒有太多的差別。然而在一些特殊的實驗里，如雙標實驗里，如果兩個一抗一個山羊來源，一個小鼠來源，則相應的二抗分別要抗山羊和抗小鼠的二抗，這時候，二抗就不能選擇山羊或者小鼠來源的。

二抗的耦聯(lián)標記：

       耦聯(lián)到二抗上的標記主要有酶（辣根過氧化酶HRP和堿性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP），熒光基團（FITC、PE、Dylight等），生物素，金顆粒。選用哪種探針的二抗主要取決于具體的實驗。對于WesternBlot和ELISA，常用的二抗是酶標二抗；而細胞或組織標記實驗（細胞免疫化學、組織免疫化學、流式細胞術）中常用熒光基團標記的二抗；免疫組化中也可以使用HRP或AP標記的二抗。

二抗的純度：

       親和層析純化相對于傳統(tǒng)的血清純化、鹽沉淀等方法更加高效，得到的抗體純度較高，產(chǎn)生的非特異性背景少，所以親和層析純化的抗體一般更受人們歡迎。

血清吸附處理：

       經(jīng)過血清吸附過的二抗排除了與相關物種組織可能發(fā)生非特異性反應的免疫球蛋白，因此將二抗與樣本的非特異性結(jié)合降低到最低。如經(jīng)過人血清吸附過的二抗，在檢測過程中就不會與樣本中人的免疫球蛋白發(fā)生交叉反應。

西美杰代理的KPL品牌是專業(yè)親和純化二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商，擁有40余年的產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗，2013年被知名體外診斷試劑供應商SeraCare收購，深受廣大診斷企業(yè)好評。下表是KPL熱賣二抗推薦：

檢測物種

Unlabeled

HRP

AP

FITC

Cy3

Cy5

兔

5210-0174

5220-0336

5220-0308

5230-0426

5230-0359

5230-0372

小鼠

5210-0185

5220-0341

5220-0310

5230-0427

5230-0364

5230-0376

人

5210-0158

5220-0330

5220-0303

5230-0288

5230-0355

5230-0370

大鼠

5210-0179

5220-0364

5220-0377

5230-0301

5230-0361

-

山羊

5210-0170

5220-0362

5220-0384

5230-0294

5230-0358

5230-0371

雞

5210-0205

5220-0373

5220-0389

5230-0325

-

5230-0379

狗

5210-0195

5220-0368

5220-0387

5230-0314

-

-

猴

5210-0216

5220-0333

-

5230-0422

-

-

火雞

5210-0207

5220-0374

-

5230-0327

-

-

馬

5210-0201

5220-0370

5220-0380

5230-0320

-

-

貓

5210-0198

5220-0369

5220-0379

5230-0317

-

-

綿羊

5210-0204

5220-0372

5220-0388

5230-0324

-

5230-0378

牛

5210-0169

5220-0361

5220-0383

5230-0293

-

-

豚鼠

5210-0181

5220-0366

5220-0378

5230-0303

-

-

倉鼠

-

5220-0371

-

-

-

-

雪貂

-

-

5220-0320

-

-

-

豬

5210-0171

5220-0363

5220-0306

5230-0297

-

-

鴨

5210-0206

5220-0296

-

5230-0326

-

-

鹿

5210-0209

5220-0298

-

5230-0329

-

-

白足鼠

5210-0210

5220-0375

5220-0382

-

-

-

鏈霉親和素

-

5270-0029

5270-0030

5270-0028

5270-0022

5270-0023


      KPL還有人、大鼠、猴、山羊、豚鼠、雞等種屬的Dylight標記二抗，更多產(chǎn)品咨詢歡迎登陸西美杰官方網(wǎng)站：www.arbokusa.com；或撥打全國熱線電話：400-050-4006。

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